項(xiàng)目介紹
基因編輯技術(shù)-CRISPR/Cas9（Clustered regularly interspaced short palindromic repeats），通過對預(yù)設(shè)的DNA位點(diǎn)進(jìn)行切割，造成DNA雙鏈斷裂，隨后細(xì)胞啟動(dòng)修復(fù)機(jī)制，在修復(fù)過程中可以產(chǎn)生基因定點(diǎn)修改或基因轉(zhuǎn)入，實(shí)現(xiàn)基因敲除、基因敲進(jìn)、基因替換、點(diǎn)突變等。 周期短，能夠快速地對影響目標(biāo)性狀的關(guān)鍵基因進(jìn)行精確編輯，在最短的時(shí)間內(nèi)得到我們需要的基因型。
一、高活性SgRNA篩選實(shí)驗(yàn)服務(wù)
SgRNA是CRISPR基因敲除敲入系統(tǒng)中重要的組成部分，挑選******的 SgRNA仍然是目前所碰到的難題，公司結(jié)合生物信息分析構(gòu)建高活 性的SgRNA。
二、SgRNA-Cas9 重組載體構(gòu)建
公司所用Cas9已經(jīng)經(jīng)過優(yōu)化，并在兩端都含有細(xì)胞核定位信號。具有效率高，脫靶率低，方便快捷的特點(diǎn)。
三、SgRNA-Cas9-XFP 熒光蛋白重組載體構(gòu)建
載體中包含一個(gè)以熒光蛋白（XFP）作為篩選標(biāo)記，分別可表達(dá)GFP、RFP、BFP、IFP等熒光蛋白。
四、SgRNA-Cas9-XR抗性蛋白重組載體構(gòu)建
載體中包含一個(gè)以抗性蛋白作為篩選標(biāo)記，分別可表達(dá)Puromycin、Neomycin、 Zeomycin、Hygromycin和Blasticidin等抗性蛋白。
五、高效knock-out載體構(gòu)建
利用CRISPR/Cas9技術(shù)將特定基因插入到靶基因的編碼區(qū)內(nèi)，并終止轉(zhuǎn)錄，從而達(dá)到使靶基因失活的效果。
六、高效GFP-knock-in載體構(gòu)建
利用CRISPR/Cas9技術(shù)將GFP插入到靶基因的C端，利用靶基因和GFP形成的融合蛋白可以定位和研究靶基因的特性。
服務(wù)流程
（對于模式植物擬南芥，我們提供一攬子解決方案，您只需要提供靶基因編號，我們提供全程實(shí)驗(yàn)各步驟結(jié)果。您可以選擇接受T2代（雜合突變體，攜帶sgRNA/Cas9轉(zhuǎn)基因插入序列）或T3代（純合突變體，分離掉sgRNA/Cas9 轉(zhuǎn)基因插入序列）的種子。對于其他物種，我們可提供前期靶點(diǎn)預(yù)測、靶點(diǎn)效率評估、載體構(gòu)建及后期突變體鑒定服務(wù)。）
可提供結(jié)果內(nèi)容
A基因敲除載體的圖譜、全序列和注釋信息；
B 各靶點(diǎn)的敲除株系（每個(gè)靶點(diǎn)不低于5株）；
C 每個(gè)敲除系的測序結(jié)果。
D 實(shí)驗(yàn)報(bào)告
服務(wù)內(nèi)容及周期
|
服務(wù)內(nèi)容 |
周期 |
價(jià)格 |
|
|
質(zhì)粒構(gòu)建 |
2-3周 |
2000元/靶點(diǎn) |
|
|
多靶點(diǎn) |
2-4周 |
2000+1500元/每增加1靶點(diǎn) |
|
|
對于擬南芥 |
周期 |
價(jià)格 |
鑒定line數(shù) |
|
T2代 |
16周 |
5000元/靶點(diǎn) |
≥5 |
|
T3代 |
20周 |
7000元/靶點(diǎn) |
≥5 |
常見問題