項目介紹
免疫印跡(western blot)是根據(jù)抗原抗體的特異性結合檢測復雜樣品中的某種蛋白的方法。由于western blot具有SDS-PAGE的高分辨力和固相免疫測定的高特異性和敏感性,現(xiàn)在已成為蛋白分選的一種常規(guī)技術。常用于鑒定某種蛋白,并能對蛋白進行定性和半定量分選。
樣本要求
顧客提供組織、細胞、蛋白質溶液等,一抗(公司抗體庫存里若沒有),干冰或者液氮保存寄送。樣本請注意應避免各類污染和反復凍融。
服務流程
可提供結果內(nèi)容
(1)告知蛋白質濃度及電泳上樣量
(2)原始膠片、電子圖片及圖片分析結果
(3)完整的實驗報告,包括實驗步驟,使用試劑和儀器等
服務內(nèi)容及周期
常見問題
(1)未擴出目的條帶
目的蛋白的表達量過低;
一抗或者二抗效價不足;
轉膜效率低;
(2)背景過高
封閉條件不合適;
一抗/二抗?jié)舛冗^高;
抗體與封閉劑發(fā)生交叉反應;
洗膜不足;
(3)非特異性條帶
一抗質量不佳;
目的蛋白被修飾或者降解,與目的蛋白有共同檢測表位的剪切體或同一家族成員,目的蛋白可能形成多聚體;
一抗或者二抗?jié)舛冗^高;
(4)條帶彎曲不平整
電泳遷移速度過快或遷移溫度過高