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基因編輯

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項目介紹

基因編輯技術(shù)-CRISPR/Cas9(Clustered regularly interspaced short palindromic repeats),通過對預(yù)設(shè)的DNA位點進行切割,造成DNA雙鏈斷裂,隨后細胞啟動修復(fù)機制,在修復(fù)過程中可以產(chǎn)生基因定點修改或基因轉(zhuǎn)入,實現(xiàn)基因敲除、基因敲進、基因替換、點突變等。 周期短,能夠快速地對影響目標(biāo)性狀的關(guān)鍵基因進行精確編輯,在最短的時間內(nèi)得到我們需要的基因型。


一、高活性SgRNA篩選實驗服務(wù)

SgRNA是CRISPR基因敲除敲入系統(tǒng)中重要的組成部分,挑選******的     SgRNA仍然是目前所碰到的難題,公司結(jié)合生物信息分析構(gòu)建高活 性的SgRNA。


二、SgRNA-Cas9 重組載體構(gòu)建

公司所用Cas9已經(jīng)經(jīng)過優(yōu)化,并在兩端都含有細胞核定位信號。具有效率高,脫靶率低,方便快捷的特點。


三、SgRNA-Cas9-XFP 熒光蛋白重組載體構(gòu)建

載體中包含一個以熒光蛋白(XFP)作為篩選標(biāo)記,分別可表達GFP、RFP、BFP、IFP等熒光蛋白。


四、SgRNA-Cas9-XR抗性蛋白重組載體構(gòu)建

載體中包含一個以抗性蛋白作為篩選標(biāo)記,分別可表達Puromycin、Neomycin、 Zeomycin、Hygromycin和Blasticidin等抗性蛋白。


五、高效knock-out載體構(gòu)建

利用CRISPR/Cas9技術(shù)將特定基因插入到靶基因的編碼區(qū)內(nèi),并終止轉(zhuǎn)錄,從而達到使靶基因失活的效果。


六、高效GFP-knock-in載體構(gòu)建

利用CRISPR/Cas9技術(shù)將GFP插入到靶基因的C端,利用靶基因和GFP形成的融合蛋白可以定位和研究靶基因的特性。


服務(wù)流程

(對于模式植物擬南芥,我們提供一攬子解決方案,您只需要提供靶基因編號,我們提供全程實驗各步驟結(jié)果。您可以選擇接受T2代(雜合突變體,攜帶sgRNA/Cas9轉(zhuǎn)基因插入序列)或T3代(純合突變體,分離掉sgRNA/Cas9 轉(zhuǎn)基因插入序列)的種子。對于其他物種,我們可提供前期靶點預(yù)測、靶點效率評估、載體構(gòu)建及后期突變體鑒定服務(wù)。)

可提供結(jié)果內(nèi)容

A基因敲除載體的圖譜、全序列和注釋信息;

B 各靶點的敲除株系(每個靶點不低于5株);

C 每個敲除系的測序結(jié)果。

D 實驗報告



服務(wù)內(nèi)容及周期

服務(wù)內(nèi)容

周期

價格

 

質(zhì)粒構(gòu)建

2-3周

2000元/靶點

 

多靶點

2-4周

2000+1500元/每增加1靶點

 

對于擬南芥

周期

價格

鑒定line數(shù)

T2代

16周

5000元/靶點

5

T3代

20周

7000元/靶點

5


常見問題