項目介紹
基因編輯技術(shù)-CRISPR/Cas9(Clustered regularly interspaced short palindromic repeats),通過對預(yù)設(shè)的DNA位點進行切割,造成DNA雙鏈斷裂,隨后細胞啟動修復(fù)機制,在修復(fù)過程中可以產(chǎn)生基因定點修改或基因轉(zhuǎn)入,實現(xiàn)基因敲除、基因敲進、基因替換、點突變等。 周期短,能夠快速地對影響目標(biāo)性狀的關(guān)鍵基因進行精確編輯,在最短的時間內(nèi)得到我們需要的基因型。
一、高活性SgRNA篩選實驗服務(wù)
SgRNA是CRISPR基因敲除敲入系統(tǒng)中重要的組成部分,挑選******的 SgRNA仍然是目前所碰到的難題,公司結(jié)合生物信息分析構(gòu)建高活 性的SgRNA。
二、SgRNA-Cas9 重組載體構(gòu)建
公司所用Cas9已經(jīng)經(jīng)過優(yōu)化,并在兩端都含有細胞核定位信號。具有效率高,脫靶率低,方便快捷的特點。
三、SgRNA-Cas9-XFP 熒光蛋白重組載體構(gòu)建
載體中包含一個以熒光蛋白(XFP)作為篩選標(biāo)記,分別可表達GFP、RFP、BFP、IFP等熒光蛋白。
四、SgRNA-Cas9-XR抗性蛋白重組載體構(gòu)建
載體中包含一個以抗性蛋白作為篩選標(biāo)記,分別可表達Puromycin、Neomycin、 Zeomycin、Hygromycin和Blasticidin等抗性蛋白。
五、高效knock-out載體構(gòu)建
利用CRISPR/Cas9技術(shù)將特定基因插入到靶基因的編碼區(qū)內(nèi),并終止轉(zhuǎn)錄,從而達到使靶基因失活的效果。
六、高效GFP-knock-in載體構(gòu)建
利用CRISPR/Cas9技術(shù)將GFP插入到靶基因的C端,利用靶基因和GFP形成的融合蛋白可以定位和研究靶基因的特性。
服務(wù)流程
(對于模式植物擬南芥,我們提供一攬子解決方案,您只需要提供靶基因編號,我們提供全程實驗各步驟結(jié)果。您可以選擇接受T2代(雜合突變體,攜帶sgRNA/Cas9轉(zhuǎn)基因插入序列)或T3代(純合突變體,分離掉sgRNA/Cas9 轉(zhuǎn)基因插入序列)的種子。對于其他物種,我們可提供前期靶點預(yù)測、靶點效率評估、載體構(gòu)建及后期突變體鑒定服務(wù)。)
可提供結(jié)果內(nèi)容
A基因敲除載體的圖譜、全序列和注釋信息;
B 各靶點的敲除株系(每個靶點不低于5株);
C 每個敲除系的測序結(jié)果。
D 實驗報告
服務(wù)內(nèi)容及周期
服務(wù)內(nèi)容 |
周期 |
價格 |
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質(zhì)粒構(gòu)建 |
2-3周 |
2000元/靶點 |
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多靶點 |
2-4周 |
2000+1500元/每增加1靶點 |
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對于擬南芥 |
周期 |
價格 |
鑒定line數(shù) |
T2代 |
16周 |
5000元/靶點 |
≥5 |
T3代 |
20周 |
7000元/靶點 |
≥5 |
常見問題