知識(shí)梳理||Western Blotting實(shí)驗(yàn)中常見問題及解決方案
HvBo Gene
WesternBlotting作為生物學(xué)中最常用到的實(shí)驗(yàn)方法,雖然基本所有生物學(xué)子都會(huì),但想要得到一張干凈漂亮的結(jié)果也并不容易,會(huì)遇到各種各樣的狀況。今天小編來向大家介紹一些WB結(jié)果圖片中常見的問題及相應(yīng)的解決方案,希望能為大家提供幫助。
問題1:印跡中的氣泡
癥結(jié):轉(zhuǎn)移“三明治”組裝不恰當(dāng)
解決:1、在組裝轉(zhuǎn)移“三明治”的時(shí)候使用更多的轉(zhuǎn)印緩沖液;
2、確保在組裝“三明治”的時(shí)候移除凝膠和印跡膜之間所有的氣泡;
3、在抗體孵育前用麗春紅S為印跡膜染色,以檢查轉(zhuǎn)移質(zhì)量。
問題2:過度轉(zhuǎn)印
問題3:轉(zhuǎn)印不足
問題4:轉(zhuǎn)印不均勻
問題5:印跡背景過強(qiáng)
問題6:印跡背景有污跡
問題7:印跡背景有斑點(diǎn)
問題8:非特異條帶
問題9:檢測(cè)信號(hào)弱或無信號(hào)
結(jié)語
華博基因提供包括基因編輯和分子標(biāo)記輔助育種、基因組測(cè)序、基因定位克隆、蛋白互作、代謝組分析,基因組數(shù)據(jù)挖掘等技術(shù)服務(wù),以及土壤、水分和種子等檢測(cè)服務(wù)。
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