華博||wb樣本收集的方法
一、細(xì)胞樣品收集方法——蛋白
以T75培養(yǎng)瓶為例
1、把培養(yǎng)上清徹底轉(zhuǎn)移至50或15ml離心管中，用PBS洗滌1-2次（PBS需徹底吸干，洗液時(shí)把板傾斜），每次洗滌時(shí)，均需把PBS轉(zhuǎn)移到同一個(gè)50或15ml離心管，每培養(yǎng)瓶細(xì)胞準(zhǔn)備一個(gè)離心管，切勿混淆。
2、每培養(yǎng)瓶加入300ul RIPA裂解液（加入裂解液時(shí)，一定用放平，是細(xì)胞與裂解液充分接觸）, 把上述離心管離心（水平轉(zhuǎn)角離心機(jī)，1000RPM, 8min）,徹底移除上清，加入300ul RIPA裂解液，吹打12下后，把裂解液轉(zhuǎn)移至同一培養(yǎng)瓶中，則培養(yǎng)瓶中合并有200ul，蓋好蓋子，用封口膜封口后置于-80℃保存；注意做好標(biāo)記！
（如果用PBS洗滌后，細(xì)胞未飄起，則把600ul RIPA裂解液直接加入培養(yǎng)瓶）
二、組織樣本收集注意事項(xiàng)——組織
1、一般組織：
（1）如果已經(jīng)把組織剪碎后放置于研磨管中，把裝有組織的管子置于干冰上，把RIPA裂解液和研磨珠（1大，3中，6?。┘尤牍茏又?；
然后置于組織研磨儀進(jìn)行研磨（28次/秒，研磨兩次，每次5分鐘，兩次之間應(yīng)把組織用干冰或液氮凍結(jié)，研磨前和研磨后的樣品運(yùn)輸均需干冰運(yùn)輸），最后把裂解液收集到EP管中，然后用槍頭催打至少12下（剪切基因組DNA）；
（2）如果未能事先收取組織，請(qǐng)把裝有組織的管子置于干冰上，絕對(duì)避免復(fù)溫，根據(jù)實(shí)驗(yàn)的需要，用手術(shù)器械取適量組織后放置于研磨管中并立即剪碎（置于干冰上），把RIPA裂解液和研磨珠（1大，3中，6?。┘尤牍茏又?；
然后置于組織研磨儀進(jìn)行研磨（28次/秒，研磨兩次，每次5分鐘，兩次之間應(yīng)把組織用干冰或液氮凍結(jié)，研磨前和研磨后的樣品運(yùn)輸均需干冰運(yùn)輸），最后把裂解液收集到EP管中，最后用槍頭催打至少12下（剪切基因組DNA）。
2、特殊組織：
對(duì)如骨頭，軟骨，皮膚，筋健，這些難以用組織研磨儀研磨的組織，請(qǐng)把裝有組織的管子置于干冰上，絕對(duì)避免復(fù)溫，根據(jù)實(shí)驗(yàn)的需要，用手術(shù)器械取適量組織。
然后放置于研缽中，立即加入液氮把組織凍結(jié)，然后按照一定的技巧把組織成粉末狀（在整個(gè)研磨過(guò)程中，絕對(duì)避免組織復(fù)溫，應(yīng)及時(shí)添加液氮，以使組織保存凍結(jié)狀態(tài)）。
這時(shí)快速加入RIPA裂解液，并快速研磨幾下，待RIPA裂解液凍融后，再研磨幾下，用移液槍吸取RIPA裂解液，把研磨棒，研缽壁上的組織歲末催打下來(lái)，然后把裂解液收集到EP管中，最后用槍頭催打至少12下（剪切基因組DNA）。
山東華博基因工程有限公司（簡(jiǎn)稱華博基因），起源于2018年，是一家致力于為客戶提供全流程動(dòng)植物分子育種系統(tǒng)解決方案，集研發(fā)、設(shè)計(jì)、生產(chǎn)、銷售為一體的高新技術(shù)企業(yè)。
核心業(yè)務(wù)：基因編輯和分子標(biāo)記輔助育種、基因組測(cè)序、基因定位克隆、蛋白互作、代謝組分析、基因組數(shù)據(jù)挖掘等技術(shù)服務(wù)，以及土壤、水分和種子等檢測(cè)服務(wù)。
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